植物內(nèi)源激素是植物體內(nèi)自然產(chǎn)生的一類小分子化合物,它們在極低濃度下就能發(fā)揮多種生理作用,調(diào)控植物生長發(fā)育的每一過程。以下是一些具體的應(yīng)用:
生長調(diào)節(jié)
植物激素如赤霉素、生長素、細(xì)胞分裂素等,參與調(diào)節(jié)植物的生長方向、細(xì)胞分裂和伸長。通過檢測這些激素的水平,可以監(jiān)測植物的生長狀態(tài),及時調(diào)整栽培管理措施。
應(yīng)激響應(yīng)
植物在面對環(huán)境壓力(如干旱、鹽堿、低溫等)時,會產(chǎn)生一系列的生理反應(yīng)。植物激素如脫落酸、乙烯等在這些反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。通過檢測這些激素的變化,可以評估植物的應(yīng)激耐受能力和適應(yīng)性。
開花與果實成熟
植物激素如花青素、乙烯等,影響植物的開花和果實成熟過程。通過檢測這些激素的水平,可以預(yù)測植物的開花時間和果實成熟期,有助于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的規(guī)劃。
疾病防御
植物激素還涉及植物的抗病性。例如,茉莉酸類激素在植物抵抗病原菌侵襲中起到重要作用。通過檢測這些激素的水平,可以了解植物的健康狀況,及時采取防治措施。
檢測指標(biāo)
指標(biāo) |
方法 |
樣品 |
用量/g |
|
生長素 |
吲哚乙酸IAA |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
吲哚丁酸IBA |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
細(xì)胞分裂素 |
反式玉米素tZ |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
順式玉米素核苷cZR |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
異戊烯基腺嘌呤iP |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
異戊烯基腺嘌呤核苷iPR |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
二氫玉米素DZ |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
二氫玉米素核苷DZR |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
激動素6-KT |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
6-芐基腺嘌呤(6-BA) |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
赤霉素 |
GA1、GA3、GA4、GA7等 |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
脫落酸 |
ABA |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
水楊酸 |
水楊酸SA |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
水楊酸甲酯MeSA |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
茉莉酸 |
茉莉酸JA |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
茉莉酸甲酯MeJA |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
赤霉素(GA1、GA3、GA4、GA5、GA7、GA8、GA9、GA12、GA20、GA24、GA44、GA53)、脫落酸ABA、脫落酸-β-葡糖基酯ABAGE、茉莉酸JA、水楊酸SA、吲哚-3-乙酸IAA、吲哚-3-丁酸IBA、N-(吲哚-3-乙酰)-L-天冬氨酸IAAsp、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-苯丙氨酸IAPhe、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-異亮氨酸IAILeu、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-丙氨酸IAAla、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-色氨酸IATrp、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-纈氨酸IAVal、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-亮氨酸IALeu |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
6-芐基腺嘌呤6-BA、異戊烯基腺嘌呤iP、異戊烯基腺嘌呤核苷iPR、7-β-葡糖基-6-(異戊二烯基)腺嘌呤iP7G、9-β-葡糖基-6-(異戊二烯基)腺嘌呤iP9G、反式玉米素tZ、反式玉米素核苷tZR、順式玉米素cZ、順式玉米素核苷cZR、反式-7-β-葡糖基玉米素tZ7G、反式-9-β-葡糖基玉米素tZ9G、反式-O-β-葡糖基玉米素tZOG、反式-O-β-葡糖基-9-核糖基玉米素tZROG、二氫玉米素DZ、7-β-葡糖基二氫玉米素DZ7G、9-β-葡糖基二氫玉米素DZ9G、O-β-葡糖基二氫玉米素DZOG、O-β-葡糖基-9-核糖基二氫玉米素DZROG |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
褪黑素MT |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
高效液相色譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
動物 0.2 |
||
高效液相色譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
植物 10 |
||
油菜素內(nèi)酯BRs(BL、CS、6DCS、28-HomoBL) |
高效液相色譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
2 |
|
1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC) |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
1 |
|
乙烯 |
氣相色譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
10 |
|
獨腳金內(nèi)酯(5-脫氧獨腳金醇、獨腳金醇、Strigolactone GR24) |
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
鮮樣,-80℃避光 |
2 |
參考標(biāo)準(zhǔn)
指標(biāo) |
|
標(biāo)準(zhǔn) |
生長素 |
吲哚乙酸IAA |
Pan, XQ, Welti, et al. Quantitative analysis of major plant hormones in crude plant extracts by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry |
吲哚丁酸IBA |
||
細(xì)胞分裂素 |
反式玉米素tZ |
|
順式玉米素核苷cZR |
||
異戊烯基腺嘌呤iP |
||
異戊烯基腺嘌呤核苷iPR |
||
二氫玉米素DZ |
||
二氫玉米素核苷DZR |
||
激動素6-KT |
||
6-芐基腺嘌呤(6-BA) |
||
赤霉素 |
GA1、GA3、GA4、GA7等 |
|
脫落酸 |
ABA |
|
水楊酸 |
水楊酸SA |
|
水楊酸甲酯MeSA |
||
茉莉酸 |
茉莉酸JA |
|
茉莉酸甲酯MeJA |
||
赤霉素(GA1、GA3、GA4、GA5、GA7、GA8、GA9、GA12、GA20、GA24、GA44、GA53)、脫落酸ABA、脫落酸-β-葡糖基酯ABAGE、茉莉酸JA、水楊酸SA、吲哚-3-乙酸IAA、吲哚-3-丁酸IBA、N-(吲哚-3-乙酰)-L-天冬氨酸IAAsp、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-苯丙氨酸IAPhe、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-異亮氨酸IAILeu、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-丙氨酸IAAla、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-色氨酸IATrp、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-纈氨酸IAVal、N-(羥吲哚-3-乙酰)-L-亮氨酸IALeu |
NY/T 2871-2015 水稻中43種植物激素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
|
6-芐基腺嘌呤6-BA、異戊烯基腺嘌呤iP、異戊烯基腺嘌呤核苷iPR、7-β-葡糖基-6-(異戊二烯基)腺嘌呤iP7G、9-β-葡糖基-6-(異戊二烯基)腺嘌呤iP9G、反式玉米素tZ、反式玉米素核苷tZR、順式玉米素cZ、順式玉米素核苷cZR、反式-7-β-葡糖基玉米素tZ7G、反式-9-β-葡糖基玉米素tZ9G、反式-O-β-葡糖基玉米素tZOG、反式-O-β-葡糖基-9-核糖基玉米素tZROG、二氫玉米素DZ、7-β-葡糖基二氫玉米素DZ7G、9-β-葡糖基二氫玉米素DZ9G、O-β-葡糖基二氫玉米素DZOG、O-β-葡糖基-9-核糖基二氫玉米素DZROG |
NY/T 2871-2015 水稻中43種植物激素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 |
|
褪黑素MT |
吳艷迪. 葡萄褪黑素含量變化及其合成基因SNAT原核表達分析 |
|
施龍清,解振興,姜照偉等.水稻褐飛虱若蟲和成蟲褪黑素含量測定及比較 |
||
趙琦,可燕,蔣嘉燁等.不同類型馬齒莧的褪黑素含量測定 |
||
油菜素內(nèi)酯BRs(BL、CS、6DCS、28-HomoBL) |
Feifeng Huo, Xin Wang, Yehua Han, Yu Bai, et al. A new derivatization approach for the rapid and sensitive analysis of brassinosteroids by using ultra high performance liquid chromatography-electrospray ionization triple quadrupole mass spectrometry |
|
1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC) |
馬瑩瑩,蓋穎,陳偉奇等.一種用高效液相色譜-電噴霧/串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-ESI/MSn)定量檢測植物組織中微量1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC)含量的方法 |
|
乙烯 |
GH/T 1405-2022 果蔬貯藏過程中乙烯釋放速率的測定 氣相色譜法 |
|
獨腳金內(nèi)酯(5-脫氧獨腳金醇、獨腳金醇、Strigolactone GR24) |
葉兒翠,丁俊,馮鈺锜.雙層固相萃取-液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法測定水稻中獨腳金內(nèi)酯[J].分析科學(xué)學(xué)報,2017,33(03):297-301. |
檢測方法
高效液相色譜法檢測植物內(nèi)源激素
高效液相色譜法(HPLC)是一種常用于植物內(nèi)源激素檢測的技術(shù)。該方法通過將植物激素與特定的固定相進行分離,然后利用檢測器對分離出的植物激素進行定量分析。HPLC法具有分離效果好、分析速度快、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點,但需要專用的儀器設(shè)備,操作較為復(fù)雜。
液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測植物內(nèi)源激素
液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)是一種更為先進的植物內(nèi)源激素檢測技術(shù)。它結(jié)合了液相色譜的分離能力和質(zhì)譜的高靈敏度和選擇性質(zhì)量分析能力。LC-MS/MS法通過在高壓下流過的流動相將含有目標(biāo)分析物的樣品溶液泵送通過固定相(LC柱),然后將流出物導(dǎo)入質(zhì)譜儀,通過電離源使樣品離子化,并在高真空下通過質(zhì)量分析器進行分離和檢測。這種技術(shù)具有高分離系數(shù)、多重檢測能力、定量準(zhǔn)確度和高靈敏度等特點,因此被廣泛應(yīng)用于環(huán)境、有機合成、制藥等領(lǐng)域。
對比與選擇
高效液相色譜法在植物激素檢測中的主要優(yōu)勢
高靈敏度:HPLC能夠檢測到極低濃度的植物激素,這對于研究植物激素在植物體內(nèi)的微小變化至關(guān)重要。
良好的選擇性:HPLC能夠有效地區(qū)分結(jié)構(gòu)相似的植物激素和其代謝產(chǎn)物,這有助于研究者準(zhǔn)確地識別和量化特定的植物激素。
廣泛的適用性:HPLC可以用于不同植物物種和不同組織類型的植物激素檢測,使得該技術(shù)具有很廣的應(yīng)用范圍。
簡化的前處理步驟:HPLC通常伴隨著固相萃取等前處理方法,這些方法能夠有效地減少基質(zhì)效應(yīng),提高分析的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
快速的分析速度:相比于傳統(tǒng)的色譜方法,HPLC的分析速度更快,這對于需要大量樣品快速篩查的研究尤為重要。
無需衍生化處理:HPLC不需要像某些其他分析方法那樣進行衍生物轉(zhuǎn)化,這簡化了分析流程,降低了成本,并減少了潛在的誤差。
液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)相比傳統(tǒng)的高效液相色譜法(HPLC)在植物激素檢測中的主要改進點包括:
提高靈敏度和選擇性:LC-MS/MS技術(shù)具有高靈敏度和高選擇性,能夠檢測到極低濃度的植物激素,這對于研究植物激素的生物功能至關(guān)重要。
降低檢測限:由于LC-MS/MS技術(shù)的高靈敏度,其檢測限遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)HPLC法,使得即使是微量的植物激素也能被準(zhǔn)確檢測出來。
擴大檢測范圍:LC-MS/MS技術(shù)可以分析氣相色譜-質(zhì)譜儀(GC-MS)無法分析的極性、低揮發(fā)性或蛋白類樣本,從而在植物激素檢測中具有更廣泛的應(yīng)用前景。
簡化樣品前處理:LC-MS/MS技術(shù)通常配合先進的樣品前處理技術(shù),如固相萃?。?/span>SPE),這些技術(shù)可以有效地提取和凈化植物激素,減少了傳統(tǒng)HPLC法中繁瑣的前處理步驟。
提高分析速度:LC-MS/MS技術(shù)的高通量和快速分析能力,使得植物激素的檢測更為迅速,有助于加快科研進程。
減少樣品消耗:由于LC-MS/MS技術(shù)的高靈敏度,通常需要的樣品量較少,這對于珍貴或難以獲取的植物材料尤為重要。
保證取樣代表性的方法
選擇具有代表性的樣株:應(yīng)該選取數(shù)個密度、株型、長勢、生育期等相近一致的植株混合,作為一個樣品,以減少個體間存在的差異。同時,應(yīng)避免采集過大或過小的植株、受病蟲害或機械損傷的植株,以及田邊、靠近道路、建筑的植株。
統(tǒng)一采樣時間和部位:采樣時間和部位的統(tǒng)一性對于保證數(shù)據(jù)的可比性至關(guān)重要。應(yīng)根據(jù)實驗設(shè)計和研究目的,選擇合適的時間和部位進行采樣。
快速冷凍保存:取樣后應(yīng)立即放入液氮速凍,并保存于超低溫冰箱中,以減少植物樣本在常溫下的暴露時間,從而保持激素的穩(wěn)定性。
避免交叉污染:在取樣過程中,應(yīng)采取措施避免樣品之間的交叉污染。例如,使用不同的容器和工具處理不同的樣品,并在處理前后進行適當(dāng)?shù)那鍧崱?/span>
遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程:在取樣和樣品處理過程中,應(yīng)嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP),以確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
點擊進入【學(xué)院】查看動/植物樣品的采集制備與保存運輸。
樣本要求
采集的樣品,均應(yīng)在短時間內(nèi)進行分析檢測,如不能及時分析檢測的則需要進行處理和保存,一般應(yīng)遵循的原則是:環(huán)境干燥、溫度較低、避免光照、密封保存。
鮮樣:取樣后立即放入用于包裝樣本的鋁箔或冷凍保存管(提前進行編號)并放入液氮速凍,-80℃超低溫冰箱保存,足量干冰郵寄運輸,避免反復(fù)凍融。
烘干樣:取樣后用柔軟濕布擦凈,不應(yīng)用水沖洗。盡快晾干并將樣品置于105 ℃的烘箱中烘 15min以終止樣品中酶的活動。經(jīng)過殺青之后,應(yīng)立即降低烘箱的溫度,維持在70 ~80℃,直到烘至恒重。若測定樣品中金屬元素的含量,應(yīng)注意金屬器械的污染問題,以防干擾。
如何處理以避免酶降解或轉(zhuǎn)化
樣品采集:選擇合適的植物部位,如根、莖、葉、花粉、果實、種子、花器官等新鮮材料作為提取分離的材料。為了避免植物激素的降解,材料稱重后,迅速用液氮冷凍,并保存于-80℃的冰箱中。
樣品提?。哼x擇合適的有機溶劑來提取目標(biāo)分析物,如80%甲醇是植物激素分析最常用的提取劑。在提取過程中,植物基質(zhì)中其他組分會被一并提取,因此需要進一步凈化。常用的純化方法有液相萃取法和固相萃取法等。
樣品純化:提取的植物內(nèi)源激素粗提物中含有大量的色素和酚類等干擾物質(zhì),影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,檢測前需要對粗提物進行純化。常用的純化方法有液相萃取法和固相萃取法等。其中,固相萃取法具有節(jié)省溶劑、簡單快速、重現(xiàn)性好、回收率高等優(yōu)點,已在植物內(nèi)源激素的純化方面得到越來越多的應(yīng)用。
樣品保存:在整個處理過程中,應(yīng)避免光照、高氧和高溫等外部環(huán)境,這些因素可能導(dǎo)致植物激素的降解。在提取溶劑中加入銅試劑等抗氧化劑可以幫助避免植物激素的降解。
樣品運輸:如果需要將樣品運輸?shù)綄嶒炇疫M行檢測,應(yīng)確保樣品在低溫條件下運輸,以防止激素降解。
漢廣提供“一站式”檢測服務(wù),您只需要提供樣本原樣,漢廣會嚴(yán)格按照國標(biāo)或行標(biāo),進行樣本前處理、指標(biāo)檢測,數(shù)據(jù)統(tǒng)計、報告編寫等工作,減少科研工作者的工作量。
取樣前,請與業(yè)務(wù)經(jīng)理溝通您的檢測需求,確認(rèn)樣品類型以及寄樣方式,以免影響檢測數(shù)據(jù)的真實性,造成時間及成本的損失!
服務(wù)流程
檢測儀器